ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТЕЙ АНТИМІКРОБНИХ ПРЕПАРАТІВ ТА ІМУНОЛОГІЧНИХ РЕАКЦІЙ

Анотація

Мета роботи – виготовлення пристрою для отримання серій стандартних живильних агарових блоків, призначених для дослідження антимікробної активності розчинів біологічно активних речовин: антимікробних хіміопрепаратів і антибіотиків.

Матеріал і методи. Вузол виготовлений із органічного скла і тефлону, який сумісно з чашкою Петрі складає пресформу. Кришка-корпус, із центральним різьбовим отвором, виготовлена з органічного скла, призначена для щільного закриття чашки Петрі з розрахованою кількістю розплавленого живильного агару, в процесі виготовлення живильних агарових блоків, а також для фіксації у потрібному положенні робочого диска зі штирами за допомогою з’єднувального гвинта-рукоятки.

Результати. Принцип роботи пристрою полягає в наступному. У чисту стерильну чашку Петрі вносять розрахункову необхідну (частіше 18-20 мл) кількість розплавленого і охолодженого до 45-43⁰С стерильного живильного агару. Після цього в субстрат занурюють збірний вузол пристрою з необхідним для даного дослідження змінним робочим диском. Стерилізація вузла досягається зануренням його робочої частини (пуансонів) у чашку Петрі з 20-25 мл 96⁰ етанолу на 10-15 хвилин до початку роботи. Через 5-7 хвилин при кімнатній температурі після затвердіння агару підняттям рукоятки штамп легко вивільнюється із субстрату і готовий до чергового його використання. В агаровій пластинці залишаються чітко сформовані стандартні лунки об’ємом від 0,1 до 0,5 мл. Геометрична форма і об’єм лунок залежить від форми штирів- пуансонів та глибини їх занурення з’єднуючим гвинтом рукояткою. Провівши посіви культур мікроорганізмів на поверхню при зготовлених таким чином живильних блоків, у лунки вносять відомі кількості досліджувальних антибіотиків або ж інших антимікробних препарат. Об’єм центральної лунки дозволяє вивчати поєднану дію різних комбінованих антибактеріальних препаратів та антибіотиків. Вже через 6-8 годин термостатування посівів при 37⁰С чітко визначаються зони затримки росту, розміри яких пропорційні ступеню активності досліджувального препарату. Кінцеві результати враховують через 18-24 год.

Висновки. За допомогою пристрою можна проводити відбір антибактеріальних препаратів з використанням т-культур стандартних штамів мікроорганізмів; за малий проміжок часу визначати чутливість свіжовиділених, або ж музейних штамів мікроорганізмів до розчинів антимікробних препаратів. Визначати сумісну антимікробну дію антибіотиків та інших протимікробних препаратів у одному досліді, вирішувати проблему дефіциту необхідних стандартних дисків антибіотиків, особливо нових вітчизняних та імпортних препаратів. Виключати можливість проникнення капілярним шляхом розчинів досліджуваних препаратів між пластиною живильного агару та поверхнею чашки Петрі і їх нерівномірного розподілу завдяки наявності даного прошарку в сформованих лунках. Пристрій дозволяє виявити наявність гаптенів у досліджувальних матеріалах, або ж виявити наявність специфічних прицепітуючих антитіл у сироватці хворих або вакцинованих людей із застосуванням реакцій преципітації в агиризованих гелях типу реакції Оухтерлоні (подвійної дифузії). Економити час, препарати, поживні середовища, лабораторний посуд, розчинники, антисептичні препарати, електроенергію та ряд інших матеріалів.